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            ECMO在儿童重症医学中的应用及对外周血单个核细胞AnnexinA1蛋白表达影响

            来源: www.zsalud.com 作者:chenhuixia 发布时间:2015-01-01 20:09 论文字数:102309字
            论文编号: sb2015010117090011546 论文地区:中国 论文语言:中文 论文类型:博士毕业论文 论文价格: 150
            本文是医学博士论文,本研究运用蛋白组学方法研究了ECMO术后单核细胞蛋白质表达谱变化,并对其中的AnnexinA1进行了验证。

            第一部分技术在儿童重症医学中的应用研究

            第一章研究方法与技术路线
            ECMO支持期间的镇静和镇痛管理:ECMO治疗过程中,适当镇静镇痛是必要的,具体用量根据患儿精神状态调节,但总原则是尽量减少阿片类及苯二氮卓类药物应用。ECMO治疗过程中,只要胃肠道功能可耐受,提倡早期喂养,可通过鼻胃管进行喂养,多潘立酮与红霉素的应用有助于胃排空。喂养过程中要严密监测血清和水平,维持正常的血钾和血韩水平对胃肠道功能有很大帮助。假如喂养出现严重胃潴留,那么需要进行静脉营养支持。抗凝管理在ECMO支持治疗中至关重要,血液在ECMO回路中循环也是不断与管道及膜肺等异物表面接触的一个过程,同时也启动了患儿凝血系统,促进的血栓的形成,如果在ECMO治疗过程中,膜肺后管路血栓脱落出现肺栓塞将是致命的。血液经过这些异物表面时,纤维蛋白原会點附到这些表面上,紧接着血小板點附到纤维蛋白原上并使其激活,形成纤维蛋白血小板复合物启动凝血过程。这就需要使用肝素拮抗纤维蛋白原激活启动凝血过程,但肝素的使用又可能导致插管部位、手术切口或颜内出血等并发症。

            第二章研究结果
            目前对于ECMO相关全身反应综合征的发生机制仍不甚明了,临床上也没有特别有效的治疗手段,ECMO相关全身炎症反应综合征发生机制和如何控制ECMO相关全身炎症反应综合征是目前学术界的研究热点。鉴于ECMO相关全身炎症反应对患者的危害,如能找到有效控制ECMO相关全身炎症反应的方法,就能够大大减少ECMO在临床应用的相关并发症发生率,临床医生面对可能需要呼吸循环支持的危重症患者时,可能会更早、更及时使用ECMO,而不是将其作为最后的复苏手段,那么将会彻底改变在临床上的应用现状,使更多的重症患者得到更加及时的治疗。
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            第二部分ECMO对外周血单个核细胞AnnexinA1蛋白表达影响
             

            第一章研究方法与技术路线
            利用投射扫描仪获取图像,用软件包进行图像分析,分析包括蛋白质斑点的检测、量化、背景去除和点的匹配。蛋白质斑点自动检测后,每个蛋白质斑点得到制定的SSP号码,再进行点的编辑去除一些杂点,蛋白质斑点匹配前从T1凝胶中选取一块作为参考胶,并建立一些匹配点,然后自动匹配其它蛋白质斑点,自动加到参考胶中。蛋白质斑点的量被定义为构成这个点的所有像素强度值的总和,为了准确反应蛋白质斑点的量的变化,我们将每个点的含量表示为百分含量,即一个蛋白质斑点的量占该胶内蛋白质斑点总量的百分数,也称相对含量。对比分析各组凝胶,选取表达量差异1.5倍以上的点作为后续质谱分析的候选蛋白质点。

            第二章研究结果
            鉴于AnnexinA1是一种一个重要的炎症调控蛋白,单核细胞与内皮细胞黏附的过程中起重要作用。因此,我们选择了AnnexinA1为了其中一个深入验证研究的对象。将两个时间点的外周血中单个核细胞蛋白,进行验证,结果显示表达量在开始转流后表达量开始增加,支持小时的时间点表达量增加明显图。本研究运用蛋白组学方法研究了ECMO术后单核细胞蛋白质表达谱变化,并对其中的AnnexinA1进行了验证。初步揭示了ECMO诱导单核细胞参与炎症反应的分子机制,为进一步研究提供了有效的切入点,并为临床中预防和控制ECMO后SIRS提供了理论基础。但对于包括AnnexinA1在内的这些差异蛋白质,在ECMO所诱导的全身炎症反应综合症中,如何被激活,并如何通过不同炎症信号转导通路发挥各自的作用机制还需要进一步的深入研究。

            第一部分ECMO在儿童重症医学中的应用研究........1
            第一章研究方法与技术路线..........5
            第二章研究结果..........19
            第二部分ECMO对外周血单个核细胞AnnexinA1蛋白表达影响..........51
            第一章研究方法与技术路线.........53
            第二章研究结果...........56
            综述一技术在儿童重症医学的开展现状................69
            综述二相关炎症反应的发生机制与控制.............81

            综述一技术在儿童重症医学的开展现状
             

            该模式是在患者静脉系统并联一个血液循环回路,通过中心静脉插管将血液引流出体外,粟提供动力将血液泉入氧合器,在氧合器中达到氧合及排除二氧化碳目的,然后再通过另一个静脉通道,将血液回输至患者静脉系统。静脉插管可以同时应用两根静脉插管或者使用单根双腔静脉插管,单根双腔静脉插管优点在于可以通过经皮穿刺放置,避免结扎颈内静脉,双根静脉插管一般需要通过床旁手术行静脉切开放置,治疗结束时需要结扎颈内静脉,对于婴幼儿,一般插管部位需选择颈内静脉和股静脉,多个手术切口也相应增加感染风险。不管如何,熟练娴熟的插管技术是治疗成功的先决条件,是否能顺利、成功进行插管关系到治疗成败。因为需要辅助治疗的患儿往往病情危重,存在严重低氧血症或者循环功能衰竭,插管时患儿往往一般状态较差,这就对操作者提出来更高的技术要求和强大的心理素质。
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            综述二相关炎症反应的发生机制与控制
             

            管理ECMO患者的医生都能够注意到,在ECMO开始后即发生“全身炎症反应,在体外转流中,血液和血液成分持续暴露于非生物合成的体外循环管道表面。血液与人工表面接触后,全身炎症反应被激活,这被认为与心肺转流(的灌注后”综合征相关这一全身反应可导致广泛的器官损伤和术后并发症。ECMO与用于心脏手术的标准不同,主要在于时间长短不同。多数心脏直视手术需要数小时的,而接受ECMO支持的患者需经历数天甚至数周的治疗过程。由于低灌注、低氧、或远处炎症部位释放的炎性介质的刺激,内皮细胞的表面特性可发生变化,使炎症细胞能够粘附和定位。这叫做内皮激活。这种由多种剌激因子造成的内皮激活的一个主要部分就是内皮粘附分子的表达,内皮粘附分子包括选择和细胞间粘附分子1. 人类补体系统有9种不同的酶前体组成,它们通常存在于血衆和其他体液中。这些酶通常为非激活状态,但一旦被激活,它们对炎症反应的放大起到重要作用。补体由多种细胞生成,包括巨隨细胞、受损伤细胞或白细胞释放的水解酶。激活的补体判断以a标记。
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            参考文献(略)


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